新到的血清应该如何储存?
如何解冻血清以确保其活性?
血清在4℃冰箱中能保存多久?
作为细胞培养中的大量血清使用者,您是否经常遇到这些问题?毕竟,血清是一种珍贵的东西,应该珍惜。如果你不小心,可能会导致实验失败,你将不可避免地受到导师的责备。
这些问题应该如何解决?有标准答案吗?作为高级试剂,我们研究了血清的储存和解冻。
如果你有同样的疑问,请继续阅读。
注意
常规贮藏
首先,刚到达的血清,在仍然冷冻的情况下,迅速将其放入-20℃的冰箱中,以避免反复冷冻和解冻。当然,如果你的研究小组不需要钱,在-80℃的冰箱里有足够的空间,储存血清也没有问题。
稳步的
注意
如何解冻
许多学生会说这是解冻的血清。我知道血清!
把它放在4℃过夜
嗯。。。怎么说呢,很多人都使用在4℃冰箱中直接融化过夜的方法,但仍然存在一些潜在的风险。
我们都知道,在这种血清混合物中,血清的融化速度:蛋白质等干物质>;水是一种溶剂,所以蛋白质会先溶解沉淀,而水仍处于冰的状态,导致瓶子中间有一个透明的冰柱,而周围会呈现黄色和红色的层状混浊液体状态。在使用过程中,易产生沉淀、混合不均、局部浓度高等问题,影响细胞生长。
更重要的是,血清中珍贵的活性物质,如生长因子,在解冻过程中也有类似的细胞复苏经验。它们都需要快速解冻,以最大程度地保持生物活性。显然,4℃夜间长期处理可能会导致一些“营养”的损失,并影响细胞生长。
因此,为了更好地保留血清中的活性成分,使细胞培养更稳定,我们建议使用三步溶解法。具体方法如下表所示。需要它的学生可以保存屏幕截图。
如果血清储存在-80℃下,需要提前几天(至少24小时)将其转移到-20℃的冰箱中,然后用三步法溶解,以避免因温差过大而导致血清失活。
注:此方法是国际通用的,适用于所有媒体。在水浴过程中,血清平面应完全浸入水中。在融化过程中,缓慢摇动瓶子以混合血清,但不要在摇动过程中产生泡沫!
血清彻底解冻后,可根据实验需要分装,以确保每一部分足以一次使用,如25ml/管、50ml/管等。密封后,迅速将其放回-20℃冰箱中进一步储存。当需要准备培养基时,从-20℃冰箱中取出一根试管进行解冻(最好准备好所有的培养基,不要多余),这样可以有效避免反复冻融的问题(遵循准备和解冻的原则)。制备的培养基可储存在4℃冰箱中。
注意
4℃保存时间
看,问题又来了。制备的培养基或剩余的少量血清能在4℃冰箱中保存多久?
让我们先给出一个合理的答案
七
白天
在正常情况下,解冻的血清,无论是制备成完整的培养基还是保存在冰箱中,都不应超过一周(7天)。原因也很简单。如果储存时间过长,生长因子等物质容易失活,相对容易受到污染,影响实验结果。
我不知道今天这期的内容是否解决了大家的疑问。无论是国产还是进口血清,都不便宜。请小心使用这些昂贵的试剂,以最大限度地发挥其功效,但你不能让白银白白流失!
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